抗体修饰
KLH, BSA, OVA Conjugates
多肽-蛋白缀合物用于多肽抗体定制,单独的多肽分子太小,不能引起足够的免疫应答,含有许多表位的载体蛋白有助于刺激T细胞,这有助于诱导B细胞应答。
多肽-蛋白缀合物作为一个整体引起免疫反应,在多肽合成中需要使用linker和载体蛋白。
常用的载体蛋白有:
- KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin), 一种含铜,非血红素蛋白,在节肢动物和软体动物中发现。它与Megathura crenulata隔离,分子量4.5×105~1.3×10 7Da。KLH是最常选择的载体,因为其与BSA相比具有更高的免疫原性。
- BSA (牛血清蛋白),牛血浆蛋白,属于最稳定和可溶性白蛋白。它分子量67×103Da,含有59个赖氨酸。大约30-35个这些伯胺可用于接头缀合,这使得BSA成为用于弱抗原化合物的普遍的载体蛋白。BSA的缺点是其在许多实验中用作封闭缓冲液试剂。如果多肽-BSA缀合物的抗血清用于这种测定中,则可能发生假阳性,因为这些血清也含有针对BSA的抗体。
- OVA (卵清蛋白), 一种从鸡蛋清分离的蛋白质,分子量为为45×103Da。它是作为第二载体蛋白质的良好选择,以验证抗体是否对多肽肽单独而不是载体蛋白(例如BSA)是特异性的。
MAP是可用于直接免疫以产生抗体的分支肽。MAP通常足够大以提高免疫应答。
将感兴趣的抗原肽直接在支链结构上合成。分支肽常有4分支和8分支。
8分支肽和多肽-蛋白质缀合物的示意图:
